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奧瑞達(dá)生物淺談如何區(qū)分雙抗夾心法、間接法和競爭法

發(fā)布時間: 2022-10-28  點擊次數(shù): 1968次

近年來,ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應(yīng)用,ELISA試劑盒根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,又分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等幾種類型。

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那么,這幾種類型分別應(yīng)用于哪些實驗?這些類型的優(yōu)缺點又是什么呢?請繼續(xù)往下看!

雙抗體夾心法測抗原:雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。

雙抗原夾心法測抗體:反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。


間接法:是檢測抗體常用的方法,本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。 

競爭法測抗體:當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合??笻Be的檢測一般采用此法。 


競爭法測抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,最后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。


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